uzspbgmuУчёные записки Первого Санкт-Петербургского государственного медицинского университета имени академика И. П. ПавловаThe Scientific Notes of the Pavlov University1607-41812541-8807Academician I.P. Pavlov First St. Petersburg State Medical University10.24884/1607-4181-2020-27-3-41-49uzspbgmu-754Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ РАБОТЫORIGINAL PAPERSКлинико-морфологическая дифференциальная диагностика форм врожденного гиперинсулинизма до этапа иммуногистохимического исследования залитых препаратов поджелудочной железы у детейClinical and morphological differential diagnosis of congenital hyperinsulinism before the stage of immunohistochemical study of paraffin-embedded specimens of pancreas in childrenhttps://orcid.org/0000-0002-1946-0029ПерминоваА. А.PerminovaA. A.

Перминова Анастасия Аркадьевна, врач-патологоанатом, очный аспирант 1-го года обучения Института медицинского образования

197341, Санкт-Петербург, ул. Аккуратова, д. 2

Perminova Anastasiia A., Pathologist, 1st year Postgraduate Student

2, Akkuratova str., Saint Petersburg, 197341

 

perminova_aa@almazovcentre.ruhttps://orcid.org/0000-0003-0735-7822МитрофановаЛ. Б.MitrofanovaL. B.

Митрофанова Любовь Борисовна, доктор медицинских наук, профессор кафедры патологии Института медицинского образования, главный научный сотрудник НИЛ патоморфологии

Санкт-Петербург

Mitrofanova Lubov B., Dr. of Sci. (Med.), Professor of the Department of Pathology of the Institute of Medical Education, Chief Research Fellow of the Scientific Research Laboratory of Pathomorphology

Saint Petersburg

lubamitr@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0002-8734-2227СухоцкаяА. А.SukhotskayaA. A.

Сухоцкая Анна Андреевна, кандидат медицинских наук, доцент, зав. отделением детской хирургии пороков развития Института перинатологии и педиатрии

Санкт-Петербург

Sukhotskaya Anna A., Cand. of Sci. (Med.), Associate Professor, Head of the Department of Pediatric Surgery for Congenital Pathology

Saint Petersburg

sukhotskaya_aa@almazovcentre.ruhttps://orcid.org/0000-0002-8446-830XБаировВ. Г.BairovV. G.

Баиров Владимир Гиреевич, доктор медицинских наук, профессор, главный научный сотрудник НИЛ хирургии врожденной и наследственной патологии Института перинатологии и педиатрии, профессор кафедры хирургических болезней Института медицинского образования

Санкт-Петербург

 

Bairov Vladimir G., Dr. of Sci. (Med.), Professor, Chief Research Fellow of the Scientific Research Laboratory of Surgery for Congenital and Genetic Pathology, Institute of Perinatology and Pediatrics, Professor of the Department of Surgical Diseases of the Institute of Medical Education

Saint Petersburg

bairov_vg@almazovcentre.ruФедеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр имени В. А. Алмазова» Министерства здравоохранения Российской ФедерацииРоссияAlmazov National Medical Research CentreRussian Federation2020121020202734149Copyright © Перминова А.А., Митрофанова Л.Б., Сухоцкая А.А., Баиров В.Г., 20212021Перминова А.А., Митрофанова Л.Б., Сухоцкая А.А., Баиров В.Г.Perminova A.A., Mitrofanova L.B., Sukhotskaya A.A., Bairov V.G.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.sci-notes.ru/jour/article/view/754Введение

Введение. Дифференциальную диагностику между различными формами врожденного гиперинсулинизма (ВГ) требуется проводить на этапе срочного гистологического исследования, но на замороженных срезах различие между экзо- и эндокринной частями поджелудочной железы (ПЖ) визуализируется очень плохо.

Цель – поиск дифференциально-диагностических критериев очаговой и диффузной форм ВГ, пригодных для срочного гистологического исследования.

Методы и материалы

Методы и материалы. Операционный материал ПЖ от 25 детей с ВГ, из них 15 случаев очаговой формы (ОВГ) и 10 – диффузной (ДВГ), и аутопсийный материал от 10 детей без ВГ (К). Из ткани ПЖ были изготовлены замороженные и парафиновые срезы, окрашенные гематоксилин-эозином и гистохимическими окрасками. Было оценено число эндокриноцитов с крупными ядрами в 10 полях зрения для каждого случая.

Результаты

Результаты. Средняя доля эндокриноцитов с крупными ядрами была статистически значимо (р<0,01) больше по сравнению с контролем как при ОВГ (в зоне поражения), так и при ДВГ (ОВГ – (1,82±0,50) %, ДВГ – (4,68±1,66) %, К – (0,34±0,21) %). Была выявлена тенденция к обнаружению бóльшего абсолютного числа клеток с крупными ядрами при ОВГ ((4,95±1,24) ОВГ и (3,71±1,56) ДВГ). Окрашивание азур-эозином, пикро Маллори и PAS-реакция давали непостоянный результат, а окраски толуидиновым синим и по Май – Грюнвальду не позволяли дифференцировать экзо- и эндокринные части ПЖ.

Заключение

Заключение. Критерий увеличения в размерах ядер эндокриноцитов непригоден для дифференциальной диагностики форм ВГ, а гистохимические окраски не дают стабильно качественного результата. Для срочного биопсийного исследования необходимы новые скоростные иммуногистохимические методики.

Introduction

Introduction.Differential diagnosis of various forms of congenital hyperinsulinism (CH) is required at the stage of urgent histological examination, but the difference between the exo- and endocrine parts of the pancreas in frozen sections is visualized very poorly.

The objective was to search for differential diagnostic criteria of focal and diffuse forms of CH, suitable for urgent histological examination.

Methods and materials

Methods and materials. Pancreatic surgery material from 25 children with CH, of which 15 cases of focal form (FCH) and 10 cases of diffuse (DСH), and autopsy material from 10 children without CH (K). Frozen and paraffin sections stained with hematoxylin-eosin and histochemical stains were made from the tissue of the pancreas. The number of endocrinocytes with large nuclei was estimated in 10 fields of view for each case.

Results

Results. The average proportion of endocrinocytes with large nuclei was significantly (p <0.01) higher compared to the control both with FCH (in the affected area) and DCH (FCH – (1.82±0.50) %, DCH – (4.68±1.66) %, K – (0.34±0.21) %). We found a tendency to detect a higher absolute number of cells with large nuclei in DCH ((4.95±1.24) DCH and (3.71±1.56) FCH). Staining with azure-eosin, picro Mallory and the PAS reaction gave unstable result, and staining with toluidine blue and May-Grunwald did not allow differentiating exo- and endocrine parts of the pancreas.

Conclusion

Conclusion. An increase in the size of the endocrinocyte nuclei was the unsuitable criterion for the differential diagnosis of CH forms, and histochemical stains did not give a stable qualitative result. For urgent biopsy examination, new immunohistochemical methods are needed.

формы врожденного гиперинсулинизмасрочное морфологическое исследование биопсий поджелудочной железыгипертрофия ядер эндокриноцитовforms of congenital hyperinsulinismurgent morphological examination of pancreatic biopsieshypertrophy of endocrinocyte nucleiКоллектив авторов благодарит за приготовление гистохимических препаратов замороженных срезов под- желудочной железы, а также залитых гистологических препаратов лабораторного техника В. Г. Миренбург, ординаторов 2-го года обучения по специальности «Патологическая анатомия» Е. Г. Кошевую и М. Г. Оганесян.ReferencesMenni F., de Lonlay P., Sevin C. et al. Neurologic outcomes of 90 neonates and infants with persistent hyperinsulinemic hypoglycemia // Pediatrics. – 2001. – Vol. 107. – P. 476–479. Doi: 10.1542/peds.107.3.476.Menni F., de Lonlay P., Sevin C. et al. Neurologic outcomes of 90 neonates and infants with persistent hyperinsulinemic hypoglycemia // Pediatrics. – 2001. – Vol. 107. – P. 476–479. Doi: 10.1542/peds.107.3.476.Lord K., De León D. D. Hyperinsulinism in the Neonate // Clinics in Perinatology. – 2018. – Vol. 45, № 1. – Р. 61–74. Doi: 10.1016/j.clp.2017.10.007.Lord K., De León D. D. Hyperinsulinism in the Neonate // Clinics in Perinatology. – 2018. – Vol. 45, № 1. – Р. 61–74. Doi: 10.1016/j.clp.2017.10.007.Stanley C. A. Advances in diagnosis and treatment of hyperinsulinism in infants and children // J. Clin. Endocrinol. Metab. – 2002. – Vol. 87. – P. 4857–4859. Doi: 10.1210/jc.2002-021403.Stanley C. A. Advances in diagnosis and treatment of hyperinsulinism in infants and children // J. Clin. Endocrinol. Metab. – 2002. – Vol. 87. – P. 4857–4859. Doi: 10.1210/jc.2002-021403.Otonkoski T., Ammala C., Huopio H. et al. A point mutation inactivating the sulfonylurea receptor causes the severe form of persistent hyperinsulinemic hypoglycemia of infancy in Finland // Diabetes. – 1999. – Vol. 48, № 2. – Р. 408–415. Doi: 10.2337/diabetes.48.2.408.Otonkoski T., Ammala C., Huopio H. et al. A point mutation inactivating the sulfonylurea receptor causes the severe form of persistent hyperinsulinemic hypoglycemia of infancy in Finland // Diabetes. – 1999. – Vol. 48, № 2. – Р. 408–415. Doi: 10.2337/diabetes.48.2.408.Mathew P. M., Young J. M., Abu-Osba Y. K. et al. Persistent neonatal hyperinsulinism // Clinical Pediatrics (Phila). – 1988. – Vol. 27, № 3. – P. 148–151. Doi: 10.1177/000992288802700307.Mathew P. M., Young J. M., Abu-Osba Y. K. et al. Persistent neonatal hyperinsulinism // Clinical Pediatrics (Phila). – 1988. – Vol. 27, № 3. – P. 148–151. Doi: 10.1177/000992288802700307.Galcheva S., Demirbilek H., Al-Khawaga S. et al. The genetic and molecular mechanisms of congenital hyperinsulinism // Front. Endocrinol. – 2019. – Vol. 10. – P. 111. Doi: 10.3389/fendo.2019.00111.Galcheva S., Demirbilek H., Al-Khawaga S. et al. The genetic and molecular mechanisms of congenital hyperinsulinism // Front. Endocrinol. – 2019. – Vol. 10. – P. 111. Doi: 10.3389/fendo.2019.00111.Sempoux Ch., Guiot Y., Jaubert F. et al. Focal and diffuse forms of congenital hyperinsulinism: the keys for differential diagnosis // Endocrine Pathology. – 2004. – Vol. 15, № 3. – Р. 241–246. Doi: 10.1385/ep:15:3:241.Sempoux Ch., Guiot Y., Jaubert F. et al. Focal and diffuse forms of congenital hyperinsulinism: the keys for differential diagnosis // Endocrine Pathology. – 2004. – Vol. 15, № 3. – Р. 241–246. Doi: 10.1385/ep:15:3:241.Han B., Mohamed Z., Estebanez M. S. et al. Atypical forms of congenital hyperinsulinism in infancy are associated with mosaic patterns of immature islet cells // J. Clin. Endocrinol. Metab. – 2017. – Vol. 102, № 9. – Р. 3261–3267. Doi: 10.1210/jc.2017-00158.Han B., Mohamed Z., Estebanez M. S. et al. Atypical forms of congenital hyperinsulinism in infancy are associated with mosaic patterns of immature islet cells // J. Clin. Endocrinol. Metab. – 2017. – Vol. 102, № 9. – Р. 3261–3267. Doi: 10.1210/jc.2017-00158.Houghton J., Banerjee I., Shaikh G. et al. Unravelling the genetic causes of mosaic islet morphology in congenital hyperinsulinism // J. Pathol. Clin. Res. – 2020. – Vol. 6, № 1. – Р. 12–16. Doi: 10.1002/cjp2.144.Houghton J., Banerjee I., Shaikh G. et al. Unravelling the genetic causes of mosaic islet morphology in congenital hyperinsulinism // J. Pathol. Clin. Res. – 2020. – Vol. 6, № 1. – Р. 12–16. Doi: 10.1002/cjp2.144.Lord K., Dzata E., Snider K. E. et al. Clinical presentation and management of children with diffuse and focal hyperinsulinism: a review of 223 cases // J. Clin. Endocrinol. Metab. – 2013. – Vol. 98, № 11. – Р. E1786–1789. Doi: 10.1210/jc.2013-2094.Lord K., Dzata E., Snider K. E. et al. Clinical presentation and management of children with diffuse and focal hyperinsulinism: a review of 223 cases // J. Clin. Endocrinol. Metab. – 2013. – Vol. 98, № 11. – Р. E1786–1789. Doi: 10.1210/jc.2013-2094.Ni J., Ge J., Zhang M. et al. Genotype and phenotype analysis of a cohort of patients with congenital hyperinsulinism based on DOPA-PET CT scanning // European Journal of Pediatrics. – 2019. – Vol. 178. – P. 1161–1169. Doi: 10.1007/s00431-019-03408-6.Ni J., Ge J., Zhang M. et al. Genotype and phenotype analysis of a cohort of patients with congenital hyperinsulinism based on DOPA-PET CT scanning // European Journal of Pediatrics. – 2019. – Vol. 178. – P. 1161–1169. Doi: 10.1007/s00431-019-03408-6.Han B., Newbould M., Batra G. et al. Enhanced islet cell nucleomegaly defines diffuse congenital hyperinsulinism in infancy but not other forms of the disease // Am. J. Clin. Pathol. – 2016. – Vol. 145. – P. 757–768. Doi: 10.1093/ajcp/aqw075.Han B., Newbould M., Batra G. et al. Enhanced islet cell nucleomegaly defines diffuse congenital hyperinsulinism in infancy but not other forms of the disease // Am. J. Clin. Pathol. – 2016. – Vol. 145. – P. 757–768. Doi: 10.1093/ajcp/aqw075.Usta A., Usta C. S., Yildiz A. et al. Frequency of fetal macrosomia and the associated risk factors in pregnancies without gestational diabetes mellitus // Pan. Afr. Med. J. – 2017. – Vol. 26. – P. 62. Doi: 10.11604/pamj.2017.26.62.11440.Usta A., Usta C. S., Yildiz A. et al. Frequency of fetal macrosomia and the associated risk factors in pregnancies without gestational diabetes mellitus // Pan. Afr. Med. J. – 2017. – Vol. 26. – P. 62. Doi: 10.11604/pamj.2017.26.62.11440.Júnior A. E., Peixoto A. B., Zamarian A. C. et al. Macrosomia // Best Pract. Res. Clin. Obstet. Gynaecol. – 2017. – Vol. 38. – P. 83–96. Doi: 10.1016/j.bpobgyn.2016.08.003.Júnior A. E., Peixoto A. B., Zamarian A. C. et al. Macrosomia // Best Pract. Res. Clin. Obstet. Gynaecol. – 2017. – Vol. 38. – P. 83–96. Doi: 10.1016/j.bpobgyn.2016.08.003.Ping F., Wang Z., Xiao X. Clinical and enzymatic phenotypes in congenital hyperinsulinemic hypoglycemia due to glucokinase-activating mutations: a report of two cases and a brief overview of the literature // J. Diabetes Investig. – 2019. – Vol. 10, № 6. – Р. 1454–1462. Doi: 10.1111/jdi.13072.Ping F., Wang Z., Xiao X. Clinical and enzymatic phenotypes in congenital hyperinsulinemic hypoglycemia due to glucokinase-activating mutations: a report of two cases and a brief overview of the literature // J. Diabetes Investig. – 2019. – Vol. 10, № 6. – Р. 1454–1462. Doi: 10.1111/jdi.13072.Rosenfeld E., Ganguly A., De Leon D. D. Congenital hyperinsulinism disorders: genetic and clinical characteristics // Am. J. Med. Genet. C Semin. Med. Genet. – 2019. – Vol. 181, № 4. – Р. 682–692. Doi: 10.1002/ajmg.c.31737.Rosenfeld E., Ganguly A., De Leon D. D. Congenital hyperinsulinism disorders: genetic and clinical characteristics // Am. J. Med. Genet. C Semin. Med. Genet. – 2019. – Vol. 181, № 4. – Р. 682–692. Doi: 10.1002/ajmg.c.31737.Christiansen C. D., Petersen H., Nielsen A. L. et al. 18F-DO-PA PET/CT and 68Ga-DOTANOC PET/CT scans as diagnostic tools in focal congenital hyperinsulinism: a blinded evaluation // Eur. J. Nucl. Med. Mol. Imaging. – 2018. – Vol. 45, № 2. – Р. 250– 261. Doi: 10.1007/s00259-017-3867-1.Christiansen C. D., Petersen H., Nielsen A. L. et al. 18F-DO-PA PET/CT and 68Ga-DOTANOC PET/CT scans as diagnostic tools in focal congenital hyperinsulinism: a blinded evaluation // Eur. J. Nucl. Med. Mol. Imaging. – 2018. – Vol. 45, № 2. – Р. 250– 261. Doi: 10.1007/s00259-017-3867-1.Lord K., Radcliffe J., Gallagher P. R. et al. High risk of diabetes and neurobehavioral deficits in individuals with surgically treated hyperinsulinism // J. Clin. Endocrinol. Metab. – 2015. – Vol. 100, № 11. – Р. 4133–4139. Doi: 10.1210/jc.2015-2539.Lord K., Radcliffe J., Gallagher P. R. et al. High risk of diabetes and neurobehavioral deficits in individuals with surgically treated hyperinsulinism // J. Clin. Endocrinol. Metab. – 2015. – Vol. 100, № 11. – Р. 4133–4139. Doi: 10.1210/jc.2015-2539.Bensley R. R. Studies on the pancreas of the Guinea pig // Am. J. Anat. – 1911. – Vol. 12, № 3. – Р. 308–311.Bensley R. R. Studies on the pancreas of the Guinea pig // Am. J. Anat. – 1911. – Vol. 12, № 3. – Р. 308–311.Bowie D. J. Cytological studies of the islets of Langerhans in a teleost, Neomaenis griseus // Anat. Rec. – 1924. – Vol. 29, № 1. – Р. 57–73.Bowie D. J. Cytological studies of the islets of Langerhans in a teleost, Neomaenis griseus // Anat. Rec. – 1924. – Vol. 29, № 1. – Р. 57–73.Лилли Р. Патогистологическая техника и практическая гистохимия. – М.: МИР, 1969. – С. 274–279.Lillie R. D. Histopathologic technic and practical histochemistry. Moscow, MIR, 1969:274–279. (In Russ.).

The authors declare that there are no conflicts of interest present.